იქნებ გსურთ ცილის დენატურაცია სამეცნიერო პროექტისათვის, ან იქნებ წაიკითხეთ დენატურირებული საკვების შესახებ და გსურთ იცოდეთ როგორ მუშაობს ეს. დენატურაცია არის პროცესი, რომლის დროსაც ცილა კარგავს ფორმას და სტრუქტურას გარე ძალების მოქმედების გამო, მათ შორის სითბოს, რადიაციის, მჟავებისა და გამხსნელების ჩათვლით. ორგანული გამხსნელები, როგორც წესი, ცილებს დენატურაციას უკეთებენ. ცილის დენატურაციის ზუსტი გზა დამოკიდებულია კონკრეტულზე, რომელთანაც გსურთ მუშაობა, რადგან ისინი ყველა საჭიროებენ სხვადასხვა დენატურირების აგენტებს სხვადასხვა დონეზე. ნებისმიერი ცილის უმეტესობა შეიძლება იყოს დენატურირებული, თუ იცით რა უნდა შეიცვალოს ცილის გარემოში.
ნაბიჯები
მეთოდი 1 დან 2: ცილის დენატურირება
ნაბიჯი 1. გამოიყენეთ სითბო
სითბო არის ცილის დენატურაციის ერთ -ერთი ყველაზე მარტივი და გავრცელებული გზა. როდესაც მოცემული ცილა საკვებშია, საკვების უბრალოდ მოხარშვა მოახდენს ცილების დენატურაციას. ბევრი ცილის დენატურირება შესაძლებელია მათი გამოვლენით 100 ° C ტემპერატურაზე ან ზემოთ (212 ° F). ეს საშუალებას აძლევს ცილებს შედედება და შეამციროს მათი ხსნადობა.
ექსპოზიციის ხანგრძლივობა დამოკიდებულია იმაზე, თუ რას აყენებთ სითბოს. მაგალითად, კვერცხს შეუძლია ქვაბში მოხარშოს საშუალო სიცხეზე ხუთ წუთში, ხოლო შემწვარს შეიძლება საათები დასჭირდეს ღუმელში გამოსაცხობად
ნაბიჯი 2. წაისვით ალკოჰოლი
ალკოჰოლი არღვევს წყალბადის კავშირებს, რომლებიც წარმოიქმნება პეპტიდური ბმის ამიდურ ჯგუფებს შორის. როდესაც ცილა ექვემდებარება ალკოჰოლის ხსნარს, ალკოჰოლის მოლეკულები ქმნიან ახალ კავშირებს ცილის ჯაჭვთან. გამოიყენეთ 70% ალკოჰოლის ხსნარი ბაქტერიების უჯრედის კედლის გასარღვევად და ცილის დენატურაციისთვის.
კონცენტრირებული ალკოჰოლური სასმელები შეიძლება საშიში იყოს, რადგან ისინი აალებადი და ტოქსიკურია. ყოველთვის ატარეთ უსაფრთხოების სრული აღჭურვილობა ხელთათმანებისა და თვალის დაცვის ჩათვლით და გაატარეთ უსაფრთხო, ტემპერატურის კონტროლირებად გარემოში
ნაბიჯი 3. შეცვალეთ pH
ცილის შინაგანი სტრუქტურა შეიძლება დაიშალოს, როდესაც მისი გარემო ძალიან მჟავე ან ძალიან ტუტეა, რადგან ისინი არღვევენ იონურ კავშირებს, რომლებიც ცილის მარილის ხიდებს ერთმანეთთან აკავებენ. დაამატეთ მჟავა ან ფუძე ხსნარი ცილას. მიმდებარე გარემო უნდა იყოს pH- ზე 10 -ზე ზემოთ ან 4 -ზე დაბლა, რათა ხელი შეუწყოს დენატურაციას. თუ თქვენ ცვლილებას იწვევს მჟავით, pH უნდა იყოს 2 -დან 5 -მდე.
PH- ის შეცვლამ შეიძლება მოახდინოს ამინომჟავის იონიზაცია, რაც დამოკიდებულია ამ ფუნქციური ჯგუფის თითოეული ფუნქციური ჯგუფის pKa- ზე. თქვენ ასევე შეგიძლიათ მოახდინოთ ამინომჟავაში არსებული ამინო ჯგუფის ან კარბოქსილის ჯგუფის იონიზაცია
ნაბიჯი 4. სცადეთ მძიმე ლითონის მარილები
მძიმე მეტალებმა შეიძლება გაანადგურონ ცილის ბმები, რის შედეგადაც იგი დაკარგავს სტრუქტურას. მძიმე ლითონების მარილები, როგორიცაა ვერცხლისწყალი და ტყვია, შეიძლება გამოყენებულ იქნას სხვადასხვა ცილების დენატურაციისთვის. ასეთი მარილები ხელმისაწვდომია ქიმიური მომწოდებლების უმეტესობისთვის და ყოველთვის უნდა იქნას გამოყენებული სიფრთხილით და შესაბამისი უსაფრთხოების აღჭურვილობით, ხელთათმანებისა და თვალის დაცვის ჩათვლით.
მძიმე მეტალებს შეუძლიათ ურთიერთქმედება ცილის ფუნქციურ გვერდით ჯაჭვურ ჯგუფებთან, რათა შექმნან კომპლექსები. მძიმე მეტალები ასევე ჟანგავს ცილის ამინომჟავის გვერდით ჯაჭვებს
მეთოდი 2 დან 2: ცილების განახლება
ნაბიჯი 1. განსაზღვრეთ შეუძლია თუ არა ცილას გადახვევა
დენატურაციის ზოგიერთი ფორმა მუდმივია, ზოგი კი შეიძლება გაუქმდეს. მაგალითად, კვერცხის ან ხორცის მომზადება არ შეიძლება გაუქმდეს, მაგრამ ცილა, რომელიც მაღალი pH- ის ზემოქმედების ქვეშ არის, შეიძლება დაიბრუნოს ფორმა უფრო ნეიტრალურ გარემოში მოთავსებისას.
შეძლებს თუ არა ცილის გახვევა დამოკიდებულია მის დნმ -ზე. დნმ შეიცავს ინფორმაციას ცილის მშობლიურ სახელმწიფოში დასაბრუნებლად
ნაბიჯი 2. ამოიღეთ დენატურირების ფაქტორი
დააბრუნეთ ცილის ირგვლივ არსებული მდგომარეობა სტაზისკენ და ამოიღეთ დენატური ელემენტი. ამოიღეთ მჟავა ან ფუძე, მაგალითად, ან დააბრუნეთ ცილა უფრო გონივრულ ტემპერატურაზე.
ნაბიჯი 3. გამოიყენეთ Renaturation ნაკრები
ლაბორატორიული აღჭურვილობის მრავალი კომპანია ყიდის რენატუტაციის ნაკრებებს, რომლებიც საშუალებას გაძლევთ ნახოთ საუკეთესო პარამეტრები რენატუტაციის წახალისების მიზნით. ასეთი ნაკრები შეიძლება განსაკუთრებით გამოსადეგი იყოს, თუ ცილებს უყურებთ ლაბორატორიულ ან ექსპერიმენტულ გარემოში.
Რჩევები
- დენატურირებული ცილა კარგავს თავის მეოთხეულ, მესამეულ და მეორად სტრუქტურას, რაც აშკარად ჩანს მის მშობლიურ მდგომარეობაში, მაგრამ მისი პირველადი სტრუქტურა დარჩება.
- დენატურირებული ცილა ასევე კარგავს თავის ბიოაქტიურობას, ზოგიერთ შემთხვევაში, ფერმენტების მსგავსად, კარგავს ფუნქციონირების უნარს. მაგალითად, სუბსტრატებმა შეიძლება ვეღარ შეძლონ დენატურირებული ფერმენტების კავშირი.
- დენატურირებულ ცილას შეუძლია დაკარგოს ხსნადობა ხსნარში.
- თქვენ ასევე შეგიძლიათ ნუკლეინის მჟავების დენატურაცია ლაბორატორიული ტექნიკის გამოყენებით ძაფების გამოყოფის მიზნით.
